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  PCR已經(jīng)成為了一種常用的實(shí)驗(yàn)技術(shù)，但在實(shí)驗(yàn)中仍存在不小的挑戰(zhàn)，比如引物的設(shè)計(jì)、PCR中的疑難雜癥等等。故在此小編整理了幾個(gè)PCR常用網(wǎng)站，希望處于困頓的您能在這里找到答案。

■ Primer3

http://primer3.sourceforge.net/webif.php

Primer3是一個(gè)引物設(shè)計(jì)線上軟件。只需輸入目標(biāo)DNA序列點(diǎn)擊搜索即可。該網(wǎng)站可對(duì)PCR產(chǎn)物的大小、引物大小、Tm范圍和其他參數(shù)進(jìn)行篩選進(jìn)而給出結(jié)果。

■ NCBI

https://link.zhihu.com/?target=https%3a//www.ncbi.nlm.gov

打開NCBI網(wǎng)站在Primer Blast中，可直接搜索到合適的引物對(duì)；也可以輸入特異性引物序列，利用Primer Blast來檢測(cè)其特異性，進(jìn)而減少非靶向擴(kuò)增。

Serial Cloner

http://serialbasics.free.fr/Serial_Cloner.html

Serial Cloner軟件可以保存DNA和引物序列，運(yùn)行虛擬PCR，進(jìn)而實(shí)現(xiàn)查看限制性位點(diǎn)，進(jìn)行酶切測(cè)試，序列比對(duì)等等。Serial Cloner還可用來制作能放在PPT甚至文章中的克隆質(zhì)粒圖譜。

 Integrated DNA technologies

https://link.zhihu.com/?target=https%3A//sg.idtdna.com/country.aspx

該網(wǎng)站能提供一些有助于PCR反應(yīng)和定量PCR實(shí)驗(yàn)的操作方法。比如，計(jì)算引物和擴(kuò)增子的一般性質(zhì)；依據(jù)具體需求來設(shè)計(jì)特異性的寡核苷酸；提供一些稀釋底物的計(jì)算方法等。

Gene Quantification Page

http://gene-quantification.info/

這個(gè)網(wǎng)站是由創(chuàng)建qPCR相對(duì)定量Pfaffl法的Michael P.Pfaffl編輯的，對(duì)于qPCR實(shí)驗(yàn)新人來說，可以找到有關(guān)qPCR的所有知識(shí)，包括qPCR新的應(yīng)用方法、定量算法、循環(huán)參數(shù)、試劑盒、染料等等。除此之外，許多商業(yè)和學(xué)術(shù)機(jī)構(gòu)都在qPCR平臺(tái)上對(duì)他們的產(chǎn)品以及實(shí)驗(yàn)方法做了非常詳細(xì)的概述。

■ ResearchGate

https://www.researchgate.net/

該網(wǎng)站有些像一個(gè)研究討論室，您可以上傳論文、參與研究相關(guān)主題的討論。在這里提問，您能獲取很多有關(guān)PCR操作的建議和討論。

■ Protocol Online  

http://www.protocol-online.org/

這個(gè)網(wǎng)站集中了很多protocol，其中很多內(nèi)容均是基于用戶體驗(yàn)的，其中包含很多有關(guān)實(shí)驗(yàn)方面的疑難解析，您可以在這里找到最合適的實(shí)驗(yàn)protocol。